PCR實(shí)驗(yàn)室主要的是實(shí)驗(yàn)室之間避免交叉感染,因此,送排風(fēng)的要求就顯得尤為重要,接下來(lái)簡(jiǎn)單介紹一下PCR實(shí)驗(yàn)室的的設(shè)計(jì):
?PCR實(shí)驗(yàn)室可分為兩個(gè)大的功能工作區(qū)域:核酸擴(kuò)增前區(qū)和核酸擴(kuò)增后區(qū)。核算擴(kuò)增前區(qū)包括試劑準(zhǔn)備間和樣本制備間,這個(gè)兩房間各自獨(dú)立,不能出現(xiàn)空氣互通,這兩個(gè)房間相對(duì)外界氣壓呈正壓狀態(tài)。核酸擴(kuò)增后區(qū)包括擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū),使用實(shí)時(shí)熒光PCR儀、HIV病毒載量測(cè)定儀的PCR實(shí)驗(yàn)室,這個(gè)兩區(qū)域可以合并為一個(gè)房間。這個(gè)區(qū)域如果是分開兩個(gè)房間,這兩個(gè)房間也必須是各自獨(dú)立,不能出現(xiàn)空氣互通。核算擴(kuò)增后區(qū)對(duì)外界氣壓呈負(fù)壓狀態(tài)。
PCR實(shí)驗(yàn)室根據(jù)使用
儀器的功能合理設(shè)置各個(gè)工作區(qū)域,如采用聚合酶聯(lián)反應(yīng):則設(shè)置試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域,這是常用的分區(qū)方式。樣品需要粉碎處理的,還需增設(shè)樣品粉碎區(qū);若使用實(shí)時(shí)熒光PCR法:基因擴(kuò)增區(qū)、基因產(chǎn)物分析區(qū)可以合并在一個(gè)房間內(nèi);采用標(biāo)本處理、核酸提取及擴(kuò)增檢測(cè)為一體的全自動(dòng)化PCR分析儀,則標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可合并為一個(gè)區(qū)域,因此PCR實(shí)驗(yàn)室原則上設(shè)置五個(gè)區(qū)或四個(gè)區(qū)或三個(gè)區(qū)或二個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)。
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備也是保證工作的不可缺少的配件,在PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)時(shí),應(yīng)根據(jù)每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的要求配套不同的儀器設(shè)備等,如:離心機(jī)、生物安全柜、超凈工作臺(tái)、加樣器,電泳儀(槽)、電轉(zhuǎn)印儀、雜交爐或雜交箱、水浴箱、DNA測(cè)序儀、酶標(biāo)儀和洗板機(jī)等。
PCR實(shí)驗(yàn)室作為分子生物學(xué)技術(shù),能夠放大DNA片段,通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能夠更快更精準(zhǔn)的檢測(cè)出人體的病毒含量,為醫(yī)學(xué)方面做出來(lái)可靠地依據(jù),為了人來(lái)帶來(lái)了先進(jìn)、迅速、高效的的醫(yī)療依據(jù)。
相關(guān)
建材詞條解釋:
擴(kuò)增
amplification其原意是作放大(率、系數(shù)、倍數(shù)、作用等)、擴(kuò)大和擴(kuò)充等。在生命科學(xué)中引伸至諸如級(jí)聯(lián)機(jī)理、氣體放大作用、個(gè)體或細(xì)胞的增殖、分子的體外增殖,即基因擴(kuò)增(gene amplification)等。至20世紀(jì)末,“擴(kuò)增”通常是指基因擴(kuò)增,尤其是采用不斷改進(jìn)的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)后,使基因能在體外擴(kuò)增2至幾萬(wàn)道爾頓長(zhǎng)度的DNA分子變成可能,經(jīng)擴(kuò)增后其拷貝數(shù)可達(dá)≥10^6。擴(kuò)增是指基因擴(kuò)增是一個(gè)不正常過(guò)程。在這過(guò)程中,同一染色體(chromosome)區(qū)域的許多復(fù)制本通過(guò)DNA復(fù)制(DNA replication),結(jié)果產(chǎn)生 “小衛(wèi)星”樣染色體;或染色體內(nèi)DNA區(qū)域出現(xiàn)多套基因復(fù)制本。在腫瘤細(xì)胞中,常發(fā)生以上現(xiàn)象。受影響基因常常成為癌基因(oncogenes)或成為對(duì)化學(xué)治療(chemotherapy)藥物具有耐藥性的基因。基因擴(kuò)增被廣泛應(yīng)用于克隆技術(shù)、基因治療、基因診斷、突變鑒定、基因定位、加快基因制圖和基因測(cè)序,為此,隨著擴(kuò)增技術(shù)不斷改進(jìn),基因擴(kuò)增必將有力推動(dòng)分子生物學(xué)的向前發(fā)展。
PCR
聚合酶鏈反應(yīng)(英文全稱:PolymeraseChain Reaction), 簡(jiǎn)稱PCR。聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復(fù)性)及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方.聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction,簡(jiǎn)稱PCR)又稱無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。
實(shí)驗(yàn)室
實(shí)驗(yàn)室是科學(xué)的搖籃,是科學(xué)研究的基地,科技發(fā)展的源泉,對(duì)科技發(fā)展起著非常重要的作用。在國(guó)際上享有盛譽(yù)的著名實(shí)驗(yàn)室更被喻為科研領(lǐng)域的麥加,是科技工作者憧憬和跟隨的處所。這些實(shí)驗(yàn)室往往代表了世界前沿基礎(chǔ)研究的最高程度,出生了一大批諾貝爾獎(jiǎng)獲得者和擁有劃時(shí)期意思的科技立異成果,是開展高檔次學(xué)術(shù)交換的重要場(chǎng)合。